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mdbioproducts M046013使用方法

 更新時(shí)間:2021-06-25 點(diǎn)擊量:966

 

Morwell Diagnostics GmbH 以及隨后于 1998 年成立的 MD Biosciences GmbH 制造和分銷用于炎癥和自身免疫疾病、腫瘤學(xué)、疼痛和代謝研究的生命科學(xué)產(chǎn)品。

我們在全球范圍內(nèi)與制藥、生物技術(shù)、學(xué)術(shù)和政府團(tuán)體合作,為您提供優(yōu)化研究過程所需的工具,使您能夠更快地實(shí)現(xiàn)目標(biāo)。我們提供用于炎癥、內(nèi)分泌學(xué)和代謝紊亂研究領(lǐng)域的抗體、試劑和檢測。

 

 mdbioproducts M046013使用方法

EPO ELISA

Erythropoietin (EPO) ELISA
Catalog Number: 
 M046013
Qty/Size: 

 96 wells

 EPO ELISA 試劑盒旨在測量人血清中的促紅細(xì)胞生成素 (EPO) 水平。該測定旨在用于研究用途,作為診斷貧血和紅細(xì)胞增多癥的輔助手段。隨著重組促紅細(xì)胞生成素作為增加紅細(xì)胞質(zhì)量的生物療法的出現(xiàn),促紅細(xì)胞生成素測定也可用于幫助預(yù)測和監(jiān)測貧血患者對重組促紅細(xì)胞生成素治療的反應(yīng)。

 

 

概述: 

促紅細(xì)胞生成素(EPO) 是一種高度糖基化的蛋白質(zhì),分子量約為 30,000 - 34,000 道爾頓。人EPO是一種由165個(gè)氨基酸組成的多肽,含有一個(gè)O-連接和三個(gè)N-連接的碳水化合物鏈。重組 EPO 是用于免疫分析的天然蛋白質(zhì)的良好替代品。血清 EPO 水平取決于蛋白質(zhì)的產(chǎn)生率和清除率。90% 的 EPO 是在成人腎臟的管周細(xì)胞中產(chǎn)生的,以響應(yīng)組織氧合的減少。有證據(jù)表明,這些細(xì)胞上檢測血液氧飽和度的蛋白質(zhì)是含血紅素的部分。隨著血漿的 pO2(血細(xì)胞比容的函數(shù))降低,EPO 濃度將增加。

 

血清促紅細(xì)胞生成素濃度的定量可作為確定貧血或紅細(xì)胞增多癥原因的診斷輔助手段。再生障礙性貧血、溶血性貧血和缺鐵性貧血都會導(dǎo)致血清EPO升高。然而,由于腎功能衰竭和其他疾病如獲得性免疫缺陷綜合征 (AIDS) 引起的繼發(fā)性貧血患者的 EPO 水平通常低于貧血程度。這很可能是由于患病腎臟產(chǎn)生足量 EPO8 的能力受損所致。低濃度的 EPO 可能會發(fā)出腎移植排斥反應(yīng)的早期預(yù)警。EPO 還可用于監(jiān)測接受齊多夫定 (AZT) 治療的艾滋病患者。EPO 濃度增加證實(shí)與 AZT 治療相關(guān)的貧血是由于紅細(xì)胞發(fā)育不全或發(fā)育不全。

 

真性紅細(xì)胞增多癥或原發(fā)性紅細(xì)胞增多癥(紅細(xì)胞量增加)是由于未受刺激的紅細(xì)胞過度產(chǎn)生所致。因此,血紅蛋白的增加會導(dǎo)致 EPO 的產(chǎn)生減少,從而導(dǎo)致血清 EPO 水平低于正常水平。繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥也以總紅細(xì)胞量增加為特征,是對組織缺氧引起的循環(huán) EPO 水平升高的生理反應(yīng)。缺氧可能是由于肺纖維化、心血管疾病、長期暴露于高海拔、血紅蛋白異?;蛩幬镏委煹纫蛩卦斐傻摹?/font>一些腫瘤會產(chǎn)生 EPO,在這些情況下,EPO 可用作腫瘤標(biāo)志物來監(jiān)測治療效果。

 

 

 

數(shù)據(jù)/規(guī)格: 

物種:人類

樣品類型:  血清

樣品量:  200 uL

標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍:  7.5 - 500 mU/mL

靈敏度:  1.2 mU/mL

檢測時(shí)長:   2.5 小時(shí)

 

這個(gè)怎么運(yùn)作: 

EPO 免疫測定是一種雙位點(diǎn) ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定),用于測量 EPO 的生物活性 165 個(gè)氨基酸鏈。它利用兩種不同的小鼠單克隆抗體對抗人類 EPO,對 EPO 分子上明確定義的區(qū)域具有特異性。一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體被生物素化,另一種針對人 EPO 的小鼠單克隆抗體用辣根過氧化物酶 (HRP) 進(jìn)行標(biāo)記以進(jìn)行檢測。 

 

在該測定中,校準(zhǔn)品、對照品或患者樣品在鏈霉親和素包被的微孔板中與酶標(biāo)抗體和生物素偶聯(lián)抗體同時(shí)孵育。在測定溫育結(jié)束時(shí),洗滌微孔以除去未結(jié)合的成分,并將結(jié)合到固相的酶與底物四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 溫育。然后加入酸性終止溶液以終止反應(yīng)并將顏色轉(zhuǎn)化為黃色。黃色的強(qiáng)度與樣品中 EPO 的濃度成正比。使用從校準(zhǔn)器獲得的結(jié)果生成吸光度單位與濃度的劑量響應(yīng)曲線。對照和患者樣品中存在的 EPO 濃度直接從該曲線確定。這些標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)根據(jù)世界衛(wèi)生組織 (WHO) 促紅細(xì)胞生成素國際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了校準(zhǔn),該標(biāo)準(zhǔn)由重組 DNA 衍生的 EPO 組成。使用的 WHO 參考標(biāo)準(zhǔn)是促紅細(xì)胞生成素第一國際標(biāo)準(zhǔn) (87/684)。

 

促紅細(xì)胞生成素 (EPO) ELISA

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