hti熒光底物
基于ANSN的植物基
的一般結(jié)構(gòu)舉例說明了基于6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）的熒光基的一般結(jié)構(gòu)。在本發(fā)明化合物家族中，R 1是三肽，其COOH-末端殘基通常是精氨酸。R 2和R 3可以是氫，烷基，芳基或環(huán)烷基。虛線表示各種絲氨酸蛋白酶的水解位點(diǎn)。
包含熒光報告基團(tuán)6-氨基-1-萘-磺酰胺（ANSN）的底物是用于監(jiān)測各種絲氨酸蛋白酶（1-12）的酶活性的有用化合物。在這類化合物中，ANSN報告基團(tuán)（在R1位置）連接至短三肽序列。設(shè)計(jì)肽序列以優(yōu)化酶和底物之間的相互作用?？梢蕴砑拥絉2和R3位置的其他組分反映了P'亞位位置的變化，并且通常影響底物的動力學(xué)參數(shù)。有效底物的化合物在三肽和ANSN基團(tuán)之間水解。一旦從肽部分上切下，ANSN基團(tuán)的相對熒光顯示出約1000倍的增加。
下一頁確定的動力學(xué)特性將有助于選擇合適的底物。事實(shí)證明，ANSN底物對因子VIIa（1-5,7,9,10,12）的分析特別有用。盡管僅因子VIIa的底物水解速率相對較慢，但將組織因子摻入測定系統(tǒng)后，幾種化合物（例如化合物SN-17a）的kcat表現(xiàn)出較大變化。
使用信息：
基于ANSN的底物在DMSO中以10mM的儲備溶液形式提供，通常可用于分析400 nM至50pM濃度范圍內(nèi)的酶。ANSN底物通常以50至100 µM的終濃度使用，并可以在大多數(shù)生理緩沖液（即TBS，HBS，PBS等）中稀釋至該終濃度。反應(yīng)（熒光的相對變化）可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計(jì)或熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行監(jiān)測。動力學(xué)或終點(diǎn)模式可與儀器一起在以下波長下使用（激發(fā)= 352nm，發(fā)射= 470nm）。通過在發(fā)射光束中使用390至450 nm長通截止濾光片，可以大程度地減少光偽影。
下表列出了每種底物的動力學(xué)性質(zhì)，表格下方包括了一些期刊參考文獻(xiàn)以供使用。
DMSO中的底物儲備溶液應(yīng)在4°C或更低的溫度下冷凍保存，并避光。在這些條件下，這些化合物將保持穩(wěn)定超過一年。
**下表的關(guān)鍵字：K m = µM；k cat = s -1 ; k cat / K m = M -1 s -1 x 10 -5 ; ND =未確定
- SN-5 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
| 結(jié)構(gòu)體 | D-AFK-ANSNH-iC 4 H 9 .2HBr |
|---|
| 對...有用 | 對纖溶酶有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | 130 |
| K 貓 | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | 3.7 |
| 鉀貓 / K M | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | 0.28 |
- SN-7 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | Mes-D-LGR-ANSN（C 2 H 5）2 |
|---|
| 對...有用 | 對因子Xa有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 31 | 180 | 200 | 125 | 580 | 113 | ND | ND |
| K 貓 | 0.63 | 0.007 | 0.79 | 36 | 15 | 0.055 | ND | ND |
| 鉀貓 / K M | 0.2 | ND | 0.04 | 2.9 | 0.26 | 0.005 | ND | ND |
- SN-13a 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | D-LPR-ANSNH-C 3 H 7 •2 HCl |
|---|
| 對...有用 | 對因子XIa有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 0.5 | 300 | 300 | 171 | 75 | 45 | 98 | ND |
| K 貓 | 19 | 0.07 | 4.5 | 3.3 | 53 | 52 | 0.31 | ND |
| 鉀貓 / K M | 380 | 0.002 | 0.15 | 0.19 | 7.1 | 12 | 0.03 | ND |
- SN-17a 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | D-FPR-ANSNH-C 6 H 11 •2 HCl |
|---|
| 對...有用 | 對凝血酶和VIIa有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 0.4 | 150 | 330 | 150 | ND | 7.8 | 36 | ND |
| K 貓 | 17 | 0.05 | 8.4 | 0.32 | ND | 6.6 | 0.074 | ND |
| 鉀貓 / K M | 430 | 0.004 | 0.25 | 0.02 | ND | 8.6 | 0.02 | ND |
- SN-17c 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | D-FPR-ANSNH-C 4 H 9 •2 HCl |
|---|
| 對...有用 | 對因子VIIa有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | ND | 186 | 102 | ND | ND | 53 | ND | ND |
| K 貓 | ND | 0.11 | 2.7 | ND | ND | 21 | ND | ND |
| 鉀貓 / K M | ND | 0.006 | 0.26 | ND | ND | 4 | ND | ND |
- SN-18 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | Boc-L-（pF）FPR-ANSNH-C 2 H 5 |
|---|
| 對...有用 | 對tPA有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 3.7 | 50 | 217 | ND | ND | ND | 71 | ND |
| K 貓 | 44 | 0.008 | 0.88 | ND | ND | ND | 1.03 | ND |
| 鉀貓 / K M | 120 | 0.002 | 0.04 | ND | ND | ND | 0.15 | ND |
- SN-20 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | Boc-L-FPR-ANSNH-C 2 H 5 |
|---|
| 對...有用 | 對凝血酶有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 17 | ND | ND | 100 | ND | 540 | 47 | ND |
| K 貓 | 58 | ND | ND | 0.31 | ND | 2.2 | 0.011 | ND |
| 鉀貓 / K M | 34 | ND | ND | 0.003 | ND | 0.04 | 0.002 | ND |
- SN-45 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | L-EGR-ANSNH-C 3 H 7 •2 HBr |
|---|
| 對...有用 | 對因子XIa有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 100 | ND | ND | 110 | 225 | 440 | ND | ND |
| K 貓 | 2.5 | ND | ND | 0.2 | 82 | 17 | ND | ND |
| 鉀貓 / K M | 0.25 | ND | ND | 0.02 | 3.6 | 0.39 | ND | ND |
- SN-54 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | 中銀D-VLR-ANSNH-C 4 H 9 |
|---|
| 對...有用 | 對APC有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 19 | 42 | 170 | 19 | ND | 3.9 | ND | ND |
| K 貓 | 0.055 | 0.007 | 1.6 | 0.055 | ND | 2.1 | ND | ND |
| 鉀貓 / K M | 0.03 | 0.002 | 0.09 | 0.03 | ND | 5.2 | ND | ND |
- SN-59 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價：請咨詢
安全數(shù)據(jù)表
| 結(jié)構(gòu)體 | D-VPR-ANSNH-C 4 H 9 •2 HCl |
|---|
| 對...有用 | 對凝血酶和aPC有用 |
|---|
| 動力學(xué)性質(zhì) | a | VIIa | VIIa / TF | a | 夏 | 電腦 | 噸PA | 纖溶酶 |
|---|
| ? 中號 | 2 | 89 | 52 | 160 | 520 | 54 | 110 | ND |
| K 貓 | 110 | 0.019 | 0.76 | 3.3 | 92 | 72 | 0.71 | ND |
| 鉀貓 / K M | 550 | 0.002 | 0.14 | 0.21 | 1.8 | 13 | 0.065 | ND |
