Cytoskeleton，Inc。成立于1993年。從一開(kāi)始我們就不斷擴(kuò)展我們的產(chǎn)品線。
Cytoskeleton，Inc。很高興為藥物篩選，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產(chǎn)品。我們專注于生產(chǎn)純化蛋白質(zhì)和易于使用的試劑盒，以研究生物化學(xué)和細(xì)胞過(guò)程。我們的試劑盒可用于少量樣品，用于基礎(chǔ)研究或小屏幕（Biochem Kits™），也可用于大屏幕的高通量樣品（CytoDYNAMIX Screens™）。
除了我們現(xiàn)有的產(chǎn)品，我們還在產(chǎn)品線中為微管，微管蛋白，運(yùn)動(dòng)蛋白，小G蛋白效應(yīng)物，GAP，GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務(wù)。
Cytoskeleton BK163-S說(shuō)明書
量
10種檢測(cè)方法（Cat。＃BK163-S）
Signal-Seeker™系列產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)旨在簡(jiǎn)化專家和非專業(yè)人士對(duì)關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白修飾的分析。全面的Signal-Seeker™試劑盒提供親和珠系統(tǒng)，可從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中分離和富集修飾的蛋白質(zhì)。然后使用針對(duì)靶蛋白的抗體通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。
產(chǎn)品用途包括
套件內(nèi)容
乙酰賴氨酸試劑盒包含以下組分：
| 裂解和蛋白質(zhì)定量步驟 | IP和預(yù)清除步驟 | 洗步驟 | 洗脫步驟 | 西部一步 |
BlastR™裂解緩沖液 BlastR™稀釋緩沖液 BlastR™過(guò)濾器 蛋白酶抑制劑雞尾酒 HDAC抑制劑雞尾酒 Precision Red™蛋白質(zhì)分析試劑 | 乙酰賴氨酸親和珠 IP控制珠
| BlastR™洗滌緩沖液
| 旋轉(zhuǎn)列 珠子洗脫緩沖液
| 化學(xué)發(fā)光試劑A. 化學(xué)發(fā)光試劑B. 抗乙酰賴氨酸-HRP抗體
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示例結(jié)果
這些套件有很多應(yīng)用，這里我們描述一個(gè)有趣的例子：
應(yīng)用1：調(diào)查顯著的乙酰化事件
使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒進(jìn)行免疫沉淀，與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)乙酰賴氨酸抗體和免疫組化乙酰賴氨酸親和珠相比較 圖1.各種乙?；?- 賴氨酸親和試劑用于來(lái)自Cos-7細(xì)胞的IP乙酰化蛋白質(zhì)，用TSA（1m M）和煙酰胺（1mM）處理（+）或未處理（ - ）6小時(shí)。（1）16.7 米 AAC04珠漿液（20升米克抗體）。（2）50 米 AAC04珠漿液（60升米克抗體）。（3）抗乙酰賴氨酸兔單克隆混合物（Cell Signaling，按制造商的說(shuō)明書1：100）。（4）乙酰ImmuneChem賴氨酸親和力珠（40 米克抗體）。（5）ImmunChem乙酰賴氨酸珠（80 米克抗體）。（6）正常小鼠IgG對(duì)照珠（60 米g抗體）。洗脫富集的乙?；鞍踪|(zhì)的總曲線，并通過(guò)蛋白質(zhì)印跡用AAC03-HRP抗體（1：3000）分析。AAC04在富集廣泛的乙?；鞍踪|(zhì)方面表現(xiàn)出色，而其他商業(yè)乙酰賴氨酸富集試劑主要富集豐富的乙酰化蛋白質(zhì)（例如乙酰化微管蛋白和組蛋白）。 |  |
使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒免疫沉淀靶特異性乙?；鞍?/strong> 圖2A：使用BlastR緩沖液分離A431細(xì)胞，未處理（ - ）或用1m M TSA和1mM煙酰胺處理（+）6小時(shí)。使用AAC04珠（60m g）進(jìn)行IP 。通過(guò)SDS-PAGE分離總細(xì)胞裂解物（輸入）和免疫沉淀的樣品，并通過(guò)蛋白質(zhì)印跡用針對(duì)EGFR的抗體（Millipore，1：1000），Hsp90（Abcam，1：20,000），P53（Sigma，1：2000）進(jìn)行分析，和RhoDGI（Millipore，1：1000） 使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒從肝臟和心臟組織中免疫沉淀乙?；鞍?/strong> 圖2B：用BlastR緩沖液獲得小鼠組織提取物（肝臟和心臟）。使用AAC04珠（60，進(jìn)行IP 米 g）或mIgG對(duì)照珠（＃CIG02，60 米在組織提取物的1mg的克）。通過(guò)SDS-PAGE分離富集的蛋白質(zhì)，并通過(guò)蛋白質(zhì)印跡用AAC03-HRP（1：3000）分析。 |  |
